《蜘蛛侠：纵横宇宙》影片讲述了新一代蜘蛛侠迈尔斯（沙梅克摩尔配音）和蜘蛛侠格温（海莉斯坦菲尔德配音）穿越多元宇宙，踏上更宏大的冒险之旅的故事。面对每个蜘蛛侠都会失去至爱的命运，迈尔斯发誓要冲破命运的诅咒，找到属于自己的英雄之路。而这一决定也引起了蜘蛛侠2099（奥斯卡·艾萨克配音）领导的蜘蛛联盟的巨大争论，一场以一敌百的蜘蛛侠内战一触即发！